一、標(biāo)準(zhǔn)概述

擬除蟲菊酯（Pyrethroids）是一類以天然除蟲菊素為母體人工合成的廣譜殺蟲劑，具有高效、低毒、低殘留等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的害蟲防治。然而，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥對水生生物具有較高毒性，且部分品種被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）列為可能致癌物。乳及乳制品作為重要的日常消費(fèi)品，其農(nóng)藥殘留問題直接關(guān)系到嬰幼兒和廣大消費(fèi)者的健康安全。目前，全球已有20多個(gè)國家和地區(qū)對乳制品中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥制定了殘留限量規(guī)定。

GB 23200.85-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳及乳制品中多種擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》 是由國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會、農(nóng)業(yè)部、國家食品藥品監(jiān)督管理總局聯(lián)合發(fā)布的一項(xiàng)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)于2016年12月18日發(fā)布，2017年6月18日正式實(shí)施，目前狀態(tài)為現(xiàn)行有效。標(biāo)準(zhǔn)共17頁，由中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版。

該標(biāo)準(zhǔn)的主要起草單位為中華人民共和國山西出入境檢驗(yàn)檢疫局等。標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1—2009給出的規(guī)則起草，由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會歸口。

GB 23200.85-2016代替SN/T 2912-2011《出口乳及乳制品中多種擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的檢測方法 氣相色譜-質(zhì)譜法》 。與舊版相比，主要變化包括：標(biāo)準(zhǔn)文本格式修改為食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)文本格式；標(biāo)準(zhǔn)名稱和范圍中“進(jìn)出口乳及乳制品"改為“乳及乳制品"；標(biāo)準(zhǔn)范圍中增加“其它食品可參照執(zhí)行"。這一變化標(biāo)志著該標(biāo)準(zhǔn)從進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)升級為覆蓋全行業(yè)的食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，適用范圍顯著擴(kuò)大。

該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了乳及乳制品中2,6-二異丙基萘、七氟菊酯、生物丙烯菊酯、烯蟲酯、芐呋菊酯、聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟丙菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、醚菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯等17種多組分農(nóng)藥殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜檢測方法。標(biāo)準(zhǔn)適用于液體乳、乳粉、煉乳、乳脂肪、干酪、乳冰淇淋和乳清粉中上述17種農(nóng)藥殘留量的檢測和確證。

二、方法原理

GB 23200.85-2016所采用的核心技術(shù)是氣相色譜-質(zhì)譜法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS），其基本原理可概括為以下步驟：

第一步：提取——試樣采用乙腈勻漿提取，同時(shí)加入氯化鈉進(jìn)行鹽析。鹽析效應(yīng)可降低目標(biāo)物在水相中的溶解度，促進(jìn)其向乙腈層分配，從而提高提取效率。

第二步：凈化——提取液分別經(jīng)C18固相萃取柱和氟羅里硅土（Florisil）固相萃取柱進(jìn)行雙重凈化。C18柱可有效去除乳制品中的脂肪等非極性雜質(zhì)，氟羅里硅土柱則可吸附去除色素、極性干擾物等。雙重凈化設(shè)計(jì)確保了提取液的高度純凈。

第三步：濃縮與定容——凈化后的洗脫液經(jīng)濃縮后，用適當(dāng)溶劑溶解定容，供儀器分析。

第四步：色譜分離——定容后的樣品溶液注入氣相色譜儀，在色譜柱中按照沸點(diǎn)和極性的差異實(shí)現(xiàn)17種目標(biāo)物的分離。

第五步：質(zhì)譜檢測與確證——分離后的各化合物依次進(jìn)入質(zhì)譜檢測器，通過選擇離子監(jiān)測（SIM）或全掃描模式進(jìn)行檢測和確證。質(zhì)譜法可提供化合物的特征碎片離子信息，實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定性確認(rèn)。

第六步：定量——采用外標(biāo)法定量，通過比較樣品中各目標(biāo)物峰的響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量計(jì)算。

這一方法的核心優(yōu)勢在于氣相色譜的高分離能力與質(zhì)譜的高選擇性確證能力的有機(jī)結(jié)合：氣相色譜可將結(jié)構(gòu)相似的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥逐一分離，質(zhì)譜則通過特征離子碎片提供準(zhǔn)確的結(jié)構(gòu)信息，兩者聯(lián)用實(shí)現(xiàn)了乳制品復(fù)雜基質(zhì)中17種目標(biāo)物的同步定性與定量。

三、試劑與材料

標(biāo)準(zhǔn)對實(shí)驗(yàn)用試劑和材料有嚴(yán)格規(guī)定，這是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)。

用水要求：實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682規(guī)定的一級水。一級水是最高純度的實(shí)驗(yàn)用水，電阻率通常不低于18.2 MΩ·cm，可有效避免水中雜質(zhì)對痕量分析的干擾。

試劑純度：除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純。其中，乙腈、正己烷、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑應(yīng)為殘留級（農(nóng)殘級）。

主要試劑：

溶液配制：

·         正己烷-乙酸乙酯（9+2，V/V） ：量取90 mL正己烷和20 mL乙酸乙酯，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品：2,6-二異丙基萘等17種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥98% ，CAS編號參見標(biāo)準(zhǔn)附錄A。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：

·         標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量的17種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用正己烷配制成濃度為100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。該溶液在0℃～4℃冰箱中保存。

四、儀器與設(shè)備

標(biāo)準(zhǔn)要求配備以下核心設(shè)備：

其中，C18固相萃取柱和氟羅里硅土固相萃取柱的雙柱串聯(lián)凈化是該方法的特色設(shè)計(jì)。乳制品基質(zhì)中含有大量脂肪、蛋白質(zhì)等干擾物質(zhì)，單柱凈化難以達(dá)到理想的純凈度。雙重凈化策略有效保障了色譜柱的壽命和質(zhì)譜檢測的準(zhǔn)確性。

五、分析步驟

1. 試樣制備

液體乳、乳粉、煉乳、乳脂肪、干酪、乳冰淇淋、乳清粉等不同形態(tài)的乳制品需根據(jù)其物理特性進(jìn)行相應(yīng)的試樣制備：

·         液體乳：充分混勻后直接稱樣

·         乳粉、乳清粉：充分混勻后稱樣

·         乳脂肪、干酪：需經(jīng)適當(dāng)處理使樣品均勻

·         乳冰淇淋：需融化后混勻

2. 樣品前處理

前處理是該方法最為關(guān)鍵的環(huán)節(jié)：

·         稱樣：準(zhǔn)確稱取2.00 g均勻樣品于50 mL離心管中

·         提取：加入10 mL乙腈，渦旋混合2分鐘

·         鹽析：加入2 g氯化鈉，再次渦旋1分鐘

·         離心：以4000 r/min離心5分鐘

·         凈化：分取乙腈層，分別通過C18固相萃取柱和氟羅里硅土固相萃取柱凈化

·         濃縮：洗脫液經(jīng)氮吹濃縮至近干

·         定容：用適當(dāng)溶劑溶解定容

·         待測：定容液供氣相色譜-質(zhì)譜儀分析

3. 色譜-質(zhì)譜分析

將處理好的樣品溶液注入氣相色譜-質(zhì)譜儀，在優(yōu)化的色譜和質(zhì)譜條件下進(jìn)行分離、檢測和確證。通過對比樣品中目標(biāo)物的保留時(shí)間及特征離子與標(biāo)準(zhǔn)品的一致性進(jìn)行定性確認(rèn)，通過選擇離子監(jiān)測（SIM）的峰面積進(jìn)行定量測定。

4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

將17種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液逐級稀釋成一系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，分別進(jìn)樣測定，以濃度為橫坐標(biāo)、響應(yīng)值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

5. 結(jié)果計(jì)算

根據(jù)樣品測定得到的響應(yīng)值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的濃度，再結(jié)合樣品稱樣量、定容體積等參數(shù)，計(jì)算樣品中各農(nóng)藥的實(shí)際殘留量。

六、關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)

1. 乙腈提取與鹽析的協(xié)同效應(yīng)

標(biāo)準(zhǔn)采用乙腈作為提取溶劑，配合氯化鈉鹽析。乙腈對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥具有良好的溶解性，同時(shí)其對脂肪的溶解能力較弱，可在提取目標(biāo)物的同時(shí)減少脂肪共提取物。氯化鈉的加入增強(qiáng)了乙腈與水相的分層效果，使目標(biāo)物更充分地分配至乙腈層，提高了提取效率。

2. 雙重固相萃取凈化——C18 + 氟羅里硅土

乳制品基質(zhì)的復(fù)雜性是該方法面臨的最大挑戰(zhàn)。標(biāo)準(zhǔn)采用C18固相萃取柱和氟羅里硅土固相萃取柱串聯(lián)凈化的策略：

·         C18柱：以十八烷基鍵合硅膠為填料，通過反相作用吸附去除乳制品中的脂肪、蠟質(zhì)等非極性干擾物

·         氟羅里硅土柱：以硅酸鎂為載體，通過極性吸附作用去除色素、極性雜質(zhì)等

雙重凈化設(shè)計(jì)確保了提取液的高度純凈，有效保護(hù)了氣相色譜柱和質(zhì)譜離子源，延長了儀器使用壽命。

3. 從行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)到國家標(biāo)準(zhǔn)的升級

GB 23200.85-2016代替SN/T 2912-2011，實(shí)現(xiàn)了從“出口"專用到“全行業(yè)"覆蓋的跨越。這一升級意味著：

·         標(biāo)準(zhǔn)具有了法律強(qiáng)制力，成為食品安全監(jiān)管的執(zhí)法依據(jù)

·         適用范圍從“進(jìn)出口乳及乳制品"擴(kuò)展為“乳及乳制品"，不再區(qū)分內(nèi)銷與出口

·         增加了“其它食品可參照執(zhí)行"的表述，為方法在其他食品基質(zhì)中的應(yīng)用提供了依據(jù)

4. 17種目標(biāo)物的同步檢測

該方法可在一次進(jìn)樣中同時(shí)完成17種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥及相關(guān)化合物的定性和定量分析。這17種化合物涵蓋了目前乳制品中最常見的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥品種，包括七氟菊酯、聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。

5. 檢出限與定量限

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)信息，17種農(nóng)藥的檢出限為0.01～0.05 mg/kg。這一靈敏度水平能夠滿足各國對乳制品中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的限量檢測要求。

七、方法優(yōu)勢與應(yīng)用價(jià)值

GB 23200.85-2016所規(guī)定的氣相色譜-質(zhì)譜法具有以下顯著優(yōu)勢：

1. 高通量、高效率：該方法可在一次進(jìn)樣中同時(shí)完成17種目標(biāo)物的定性和定量分析，大幅提升了檢測效率。

2. 確證能力強(qiáng)：質(zhì)譜檢測器可提供化合物的特征碎片離子信息，相比僅依靠保留時(shí)間的氣相色譜法，定性確證能力顯著增強(qiáng)，有效避免了假陽性結(jié)果。

3. 凈化效果好：C18和氟羅里硅土雙重固相萃取凈化設(shè)計(jì)，有效去除了乳制品中脂肪、蛋白質(zhì)、色素等復(fù)雜基質(zhì)干擾，保障了色譜柱壽命和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 適用范圍廣：標(biāo)準(zhǔn)適用于液體乳、乳粉、煉乳、乳脂肪、干酪、乳冰淇淋、乳清粉等7類乳制品，并明確“其它食品可參照執(zhí)行"，具有很好的普適性。

5. 填補(bǔ)標(biāo)準(zhǔn)空白：該標(biāo)準(zhǔn)是我國乳及乳制品中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留測定的專項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)，為乳制品質(zhì)量安全監(jiān)管提供了權(quán)威的技術(shù)依據(jù)。

6. 服務(wù)國際貿(mào)易：全球已有20多個(gè)國家和地區(qū)對乳制品中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥制定了殘留限量規(guī)定。該標(biāo)準(zhǔn)的高通量、高靈敏度檢測能力，為我國乳制品出口貿(mào)易提供了有力的技術(shù)支撐。

7. 標(biāo)準(zhǔn)升級，強(qiáng)化監(jiān)管效力：從SN/T（推薦性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)）升級為GB（強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)），意味著該檢測方法具有了法律強(qiáng)制力，為食品安全監(jiān)管提供了更有力的技術(shù)支撐。

八、注意事項(xiàng)

在實(shí)際應(yīng)用中，檢測人員需特別注意以下幾點(diǎn)：

1. 樣品的代表性：乳制品批次間可能存在差異，取樣應(yīng)確保代表性。乳粉等粉狀樣品應(yīng)充分混勻后稱樣。

2. 提取的充分性：乙腈提取和渦旋混合應(yīng)確保充分，鹽析后應(yīng)確保乙腈層與水相完全分層。離心條件和時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

3. 固相萃取柱的活化與平衡：C18柱和氟羅里硅土柱使用前應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進(jìn)行活化和平衡，否則將影響凈化效果和目標(biāo)物回收率。

4. 凈化順序的正確性：標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定先經(jīng)過C18柱，再經(jīng)過氟羅里硅土柱。順序顛倒可能導(dǎo)致凈化效果下降。

5. 濃縮過程的控制：氮吹濃縮時(shí)應(yīng)注意不要將樣品吹得過干，否則可能導(dǎo)致目標(biāo)物損失或難以復(fù)溶。

6. 試劑和用水質(zhì)量：必須使用GB/T 6682規(guī)定的一級水；乙腈、正己烷、乙酸乙酯等應(yīng)為殘留級（農(nóng)殘級）。試劑中的雜質(zhì)可能影響色譜分離效果和質(zhì)譜檢測的靈敏度。

7. 色譜-質(zhì)譜條件的優(yōu)化：不同品牌和型號的GC-MS儀器可能存在差異，檢測人員應(yīng)根據(jù)實(shí)際儀器狀態(tài)對色譜柱升溫程序、進(jìn)樣口溫度、離子源溫度等參數(shù)進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化。

8. 基質(zhì)效應(yīng)的評估：乳制品基質(zhì)復(fù)雜，可能存在基質(zhì)效應(yīng)影響定量準(zhǔn)確性。建議采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，以校正基質(zhì)效應(yīng)帶來的偏差。

9. 方法的適用范圍：該標(biāo)準(zhǔn)適用于指定的7類乳制品。對于“其它食品可參照執(zhí)行"的表述，檢測其他食品基質(zhì)時(shí)應(yīng)進(jìn)行必要的方法學(xué)驗(yàn)證。

九、總結(jié)

GB 23200.85-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳及乳制品中多種擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》以氣相色譜-質(zhì)譜法為核心技術(shù)，通過乙腈提取-鹽析和C18+氟羅里硅土雙重固相萃取凈化的前處理策略，為液體乳、乳粉、煉乳、乳脂肪、干酪、乳冰淇淋、乳清粉等7類乳及乳制品中17種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的同步測定提供了一套科學(xué)、規(guī)范、高靈敏度、高選擇性的分析方法。該標(biāo)準(zhǔn)由原國家衛(wèi)生計(jì)生委、農(nóng)業(yè)部、原食品藥品監(jiān)管總局聯(lián)合發(fā)布，替代SN/T 2912-2011，實(shí)現(xiàn)了從推薦性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)向強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)的升級。

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥作為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的殺蟲劑，其殘留問題直接關(guān)系到乳制品質(zhì)量安全和消費(fèi)者健康。全球已有20多個(gè)國家和地區(qū)對乳制品中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥制定了殘留限量規(guī)定。該標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布和實(shí)施，有效統(tǒng)一了乳及乳制品中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，填補(bǔ)了我國相關(guān)領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)空白，為乳制品質(zhì)量安全監(jiān)管和國際貿(mào)易提供了權(quán)威的技術(shù)支撐。

對于乳制品生產(chǎn)企業(yè)、檢測機(jī)構(gòu)和食品安全監(jiān)管部門而言，深入理解和正確應(yīng)用這一標(biāo)準(zhǔn)，不僅是滿足合規(guī)要求的必要前提，更是保障乳制品質(zhì)量安全、維護(hù)消費(fèi)者健康權(quán)益、應(yīng)對國際貿(mào)易技術(shù)壁壘的重要技術(shù)手段。檢測人員應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的操作步驟開展檢測工作，特別注意固相萃取凈化的關(guān)鍵控制點(diǎn)、儀器條件的優(yōu)化和基質(zhì)效應(yīng)的校正，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。隨著我國乳制品產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展和食品安全監(jiān)管的日益嚴(yán)格，該標(biāo)準(zhǔn)在行業(yè)質(zhì)量管控中的重要性將進(jìn)一步凸顯。